生命熱線的義工團主要由受曾經受過專業訓練的人士每個星期提供兩小時的義務工作。透過24小時電話輔導的方式，向澳門廣大市民提供情緒疏導及推廣珍愛生命的信息。

義工的服務精神是「尊重生命，靜心聆聽來電者的說話，分享來電者的情緒和困擾」。

日常的工作除了接聽受困擾者的來電外，閒暇時也會參加中心為義工舉辦專業的培訓課程，增進各種輔導技巧和了解各類型來電者的情況和認識到不同類型的朋友。